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基底膜六胺银染色液(PASM)是一种常用于肾小球基底膜染色的方法。这种染色方法能够显示出基底膜的细微结构,对于肾脏疾病的诊断和研究具有重要的意义。下面将为大家介绍PASM操作步骤及其注意事项。
一、PASM操作步骤
1. 制备PASM液
将5%硝酸银、0.1%六胺溶液、5%醋酸和去离子水按照1:1:8:10的比例混合,制备成PASM液。
2. 取材
取肾组织标本,切片厚度为3-5μm。
3. 烘干
将取出的切片在60℃下烘干30分钟。
4. 染色
将烘干后的切片放入PASM液中,室温下静置10-15分钟。
5. 洗涤
用去离子水将切片洗涤3次,每次1-2分钟。
6. 固定
将切片放入5%次氯酸溶液中,室温下固定5-10分钟。
7. 洗涤
用去离子水将切片洗涤3次,每次1-2分钟。
8. 脱水
用95%乙醇、绝对乙醇、苯胺清洗液和苯胺中和液进行脱水处理。
9. 封片
将切片用透明质酸盐水和封片剂进行封片。
二、注意事项
1. 制备PASM液时要按照比例严格混合,避免混合不均导致染色效果不佳。
2. 操作过程中要注意避免切片接触到手指或其他物品,亚博取款快速安全(集团)科技有限公司-亚博取款快速安全以免污染。
3. 在染色过程中要注意时间控制,过长或过短的染色时间都会影响染色效果。
4. 洗涤和脱水时要用足够的洗涤液,避免残留,影响染色效果。
5. 在封片时要注意封片剂的均匀涂布,避免气泡和划痕。
三、小标题文章
1. 制备PASM液的注意事项
制备PASM液是PASM染色的关键步骤,需要注意比例和混合方法。本篇文章将为大家详细介绍PASM液的制备方法和注意事项。
2. 取材和切片的注意事项
取材和切片是PASM染色的前置步骤,影响着染色效果和结果的准确性。本篇文章将为大家介绍取材和切片的注意事项。
3. 染色时间的控制
PASM染色时间的控制对于染色效果至关重要。本篇文章将为大家介绍PASM染色时间的控制方法和注意事项。
4. 洗涤和脱水的注意事项
洗涤和脱水是PASM染色的后续步骤,需要注意洗涤液和脱水液的选择和使用方法。本篇文章将为大家介绍洗涤和脱水的注意事项。
5. 封片的注意事项
封片是PASM染色的最后一步,也是影响染色结果的关键步骤。本篇文章将为大家介绍封片的注意事项和方法。